» » Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати

Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати

У статті розглянемо, що це таке - ПЛР діагностика? Вірус папіломи людини (ВПЛ) на сьогоднішній день є досить поширеним захворюванням, що протікає в хронічній формі і загрожує частими рецидивами. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) – найбільш сучасна методика діагностики папіломавірусу. Даний спосіб вважається дуже надійним і допомагає виявити не тільки наявність цього вірусу в людському організмі, але також його кількість і різновид. Аналіз ПЦР на ВПЛ чутливий навіть до неактивних форм вірусу, при яких зовнішні прояви у вигляді кондилом і папілом відсутні.
Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати

На чому заснований метод?

Ґрунтується на дослідженні ДНК пацієнта з метою виявлення в цьому ланцюжку присутності чужорідних компонентів. Вона складається з чотирьох нуклеотидів, які розташовуються в певній послідовності. Якщо в організм потрапляє вірус, спостерігається зміна порядку в цьому ланцюжку, що дозволяє ретельно відстежити діяльність навіть самих малозначних сторонніх часток. Методика дослідження ПЛР на ВПЛ здійснюється із застосуванням вірусних частинок, що обумовлює швидкість поділу клітин.


Що визначає дослідження?

Даний діагностичний принцип дозволяє відстежити активність ВПЛ не тільки під час його знаходження в пасивному стані, але і в інкубаційний період. ПЛР-діагностика визначає:
  • наявність в організмі ВПЛ;
  • штами, якими інфікований пацієнт;
  • кількісний вміст в організмі.
  • Папіломавірусом інфіковано більшість людей, однак сильна імунна захист пригнічує його прояви і не дозволяє розмножуватися. Таким чином, виявлення ВПЛ якісним способом не завжди може бути виправдано, так як це не раціонально в разі, якщо вірусні частинки в організмі присутні, але їх вплив настільки мінімальний, що ніяк людині не шкодить. Якісний аналіз показує позитивний результат, і це часто вводить людину в замішання.


    Кількісний метод

    Тому для діагностування найчастіше застосовується кількісний метод, який дозволяє відстежити кількість вірусних агентів в організмі і встановити, наскільки небезпечна їх діяльність. Крім цього, важливо встановити різновид штамів ВПЛ. Вони поділяються за ступенем онкогенності: одні можуть стати основним чинником виникнення онкологічних захворювань, інші ж абсолютно безпечні і можуть викликати тільки деякі косметичні проблеми.
    Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати
    В кожній окремій ситуації потрібен індивідуальний підхід, тому, перш ніж проходити дане лабораторне дослідження, бажано проконсультуватися з кваліфікованим фахівцем, який підкаже, яким способом і на які штами найкраще буде перевірятися з урахуванням стану пацієнта та клінічної симптоматики.

    Показання до проведення

    Найбільш істотним приводом проходженню дослідження ПЛР на ВПЛ є наявність на тілі бородавок. Заразитися цим вірусом можливо тільки від людини. Патогенний мікроорганізм після проникнення в кров починає розмножуватися у верхніх шарах шкірного покриву, що призводить до розвитку характерних проявів - утворення кондилом або папілом. Оскільки таке захворювання досить поширене і спостерігається майже у 80% населення, ймовірність заразитися їм вкрай висока. Папіломавіруси передаються за допомогою:
  • незахищеного статевого акту;
  • під час поцілунку;
  • при пологах дитині від мами;
  • побутовим шляхом;
  • при тісному контакті шкіри.
  • Основними показаннями для проведення дослідження мазка крові та ПЛР на ВПЛ є шкірні симптоми цього захворювання, які виглядають як висячі бородавки на нитеобразной тонкій ніжці. Навіть якщо подібних кондилом на шкірному покриві не спостерігається, вірус може бути присутнім в крові все одно, однак протягом його буде безсимптомним. Якщо у пацієнта виявляють папилломавирусные інфекції 18-го і 16-го підтипів, йому рекомендується регулярно перевірятися у таких фахівців як гінеколог і уролог, проходити діагностичні процедури і здавати аналіз на ВПЛ, тому що тільки завдяки своєчасній діагностиці є можливість запобігти розвиток деяких онкологічних захворювань.
    Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати

    Види методик

    В рамках проведення діагностики ПЛР на ВПЛ розроблені чотири основних методи тестування, кожен з яких має деякі особливості проведення та призначається з урахуванням стану хворого людини. Для вибору найкращого методу необхідна консультація фахівця. Отже, чотири методи:
  • Якісний спосіб, який застосовується для того, щоб спростувати або підтвердити факт присутності в організмі вірусу. Його основним недоліком є неможливість встановити різновид штами ВПЛ (тільки 14-21 типи). Найчастіше якісний метод використовується одночасно з іншими способами виявлення папіломавірусу. Результат передається за допомогою двох оцінок: «не виявлено» або «виявлено». Тобто дана методика або констатує факт присутності чужої ДНК, або вказує на її відсутність.
  • Генотипування – метод, який здатний визначити наявність вірусу в організмі людини і встановити його різновид. Цей спосіб застосовується у випадках, коли потрібно встановити, чи залишилася ДНК вірусу після проведеного лікування або спостерігається рецидив в результаті повторного нового зараження. Генотипування допомагає оцінити ефективність проведеної терапії за допомогою визначення типу ВПЛ. Якщо цей той же самий штам, від якого лікувався пацієнт, значить, лікування пройшло безуспішно. Якщо ж аналіз показує наявність іншого виду ВПЛ, можна свідчити про повторному зараженні.
  • Комбінований метод, який являє собою вузькоспеціалізований діагностичний спосіб, заснований на сукупності якісного та визначення 16 штаму за допомогою генотипування. Результат може бути представлений 3 відповідями: «виявлений 16 штам», «не виявлено» і «виявлено ВПЛ 16 типу включно». Даний метод використовують при підозрі на наявність такого виду папіломавірусу, який здатний викликати рак шийки матки у жінок.
  • Кількісний метод ПЛР на ВПЛ високого онкогенного ризику, який дозволяє встановити рівень вірусу в крові і відстежити його розвиток. Його вважають найбільш інформативним, оскільки він дозволяє визначити тяжкість патологічного процесу, виходячи з чого підбирається правильне лікування. Методика заснована на визначенні кількості клітин вірусу в рамках досліджуваних 100 тисяч. Якщо їх сукупність вище 5 це говорить про високої концентрації в організмі папіломавірусу, що збільшує вірогідність виникнення ракових клітин. Якщо кількість менше 3 концентрація вважається незначною.
    Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати
  • Як підготуватися і здавати аналіз?

    На ВПЛ в якості біоматеріалу можуть взяти кров, проте найчастіше проводиться забір виділень з уретри у чоловіків і шийки матки у жінок.
    Спеціальної підготовки до ПЛР на ВПЛ не вимагається. Основна умова полягає в тому, щоб за кілька годин до проведення процедури не мочитися. Крім того, бажано не вступати в сексуальні контакти за 2-3 дні до дослідження і не вживати алкогольні напої. При цьому не варто забувати про процедури інтимної гігієни.

    У чоловіків

    У чоловіків береться мазок - головка статевого органу і сечовипускальний канал обробляються розчином. Фахівець застосовує спеціальну щіточку, яка вставляється в уретру приблизно на 4 див. За допомогою легкого обертання збирається біологічний матеріал, покладений в пробірку і відправляється в лабораторію для дослідження. Зберігати його при цьому можна не більше 2 діб з моменту збору.

    У жінок

    Взяття мазка для ПЛР аналіз на ВПЛ у жінок проводиться наступним чином: на шийку матки наноситься стерильний розчин, потім за допомогою щіточки із цервікального каналу береться мазок. Пристосування вводять на глибину приблизно 1 см, після чого лікар робить зішкріб зі стінок каналу обертальними рухами. Біологічний матеріал поміщається в спеціальну пробірку, де знаходиться близько 15 секунд. В ній спеціаліст обтирає його об стінки, після чого виймає. Далі вміст пробірки відправляють на проведення лабораторного дослідження. Правильний забір матеріалу для дослідження є запорукою успішного здійснення діагностики та отримання достовірного результату. Якщо при цьому порушується стерильність, і в пробірку проникаю чужорідні мікроорганізми, при проведенні аналізу може статися розпізнання вірусу, якого насправді в організмі пацієнта немає. Помилка також може статися із-за невеликої кількості матеріалу, взятого для дослідження.
    Де здати ПЛР на ВПЛ, цікаво багатьом. Аналізи можна зробити в будь-якій медичній клініці або лабораторії, приміром, у "Інвітро" або "Гемотесте".
    Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати

    Переваги методу

    ПЛР є однією з головних методик діагностики і на сьогоднішній момент залишається найбільш затребуваною серед лікарів. Це дослідження проводиться не тільки з метою виявлення ВПЛ, але також дозволяє виявляти інші патологічні мікроорганізми, які можуть передаватися за допомогою статевих контактів. Такий аналіз допомагає діагностувати приховані інфекції, гепатити і т. д. ПЛР тест на ВПЛ має ряд переваг у порівнянні з іншими способами виявлення захворювань. Такими перевагами вважаються:
  • Висока специфічність. Аналіз допомагає з високою ймовірністю відокремити сліди чужорідних ДНК при вивченні зібраного біоматеріалу.
  • Висока продуктивність. Дослідження ПЛР є автоматизованим процесом, що допомагає провести вивчення безпосередньо в день проведення аналізу. Така швидкість дозволяє людині не хвилюватися про результати протягом тривалого часу і отримати його на руки вже через кілька днів.
  • Висока чутливість. Тестування дозволяє дослідити діяльність вірусів навіть в інкубаційний період, коли їх концентрації дуже малі. Це допомагає попередити виникнення патологічного процесу і почати своєчасну терапію.
  • Можливість проведення відразу декількох аналізів. На підставі одного взятого зразка крові можна здійснити діагностику для визначення відразу декількох захворювань. Наприклад, одночасно можна виявити збудника гонореї і хламідіозу. При цьому дана процедура не зможе негативним чином вплинути на достовірність отриманого результату.
    Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати
  • Недоліки дослідження

    Незважаючи на велику популярність і інформативність даного аналізу, існують деякі негативні моменти ПЛР діагностики на ВПЛ. Головним з них є ймовірність отримання хибнопозитивних результатів. Таке відбувається у разі, коли терапія вже проведена, інфекція знищена, але мертві клітини вірусів ще залишаються в тканинах організму. Для оновлення клітин потрібно деякий час. Якщо провести дослідження раніше 2-3 місяців після лікування, ПЛР може показувати позитивний результат. Методика не помічає ніяких відмінностей, оскільки вона націлена на пошук вірусної ДНК, яку може знаходити навіть у вже загиблих клітинах. Це сприяє отриманню хибнопозитивних результатів. Уникнути подібної ситуації можна, якщо проводити лабораторне дослідження у встановлені лікарем терміни.

    Розшифровка

    Що покаже розшифровка ПЛР на ВПЛ? Інтерпретувати результати аналізів повинен лікар. Але пацієнтові теж важливо знати про структуру бланка результатів. Якщо в аналізі зазначено «ДНК не виявлено», значить папіломавірус у крові відсутній. Якщо показник Lg 5 і більше, це свідчить про його високої концентрації в крові, Lg 3-5 — про значущій кількості, не менше 3-х — про незначне.
    Аналіз ПЦР на ВПЛ: що це таке, як підготуватися і здавати

    Псевдонегативний аналіз

    Крім того, може спостерігатися псевдонегативний аналіз. Він виникає, якщо:
  • зібраний біологічний матеріал неправильно зберігався або транспортувався;
  • були порушені умови стерильності, і в отриману кров пацієнта потрапили інші мікроорганізми;
  • внаслідок непридатності реагентів.
  • Щоб виключити ймовірність одержання хибнонегативних результатів, необхідно підбирати для проведення даного аналізу перевірену лабораторію з висококваліфікованим персоналом. Ми докладно розглянули, як і для чого проводиться ПЛР-діагностика. Що це таке, тепер зрозуміло.
    21